martes, 15 de septiembre de 2009

PrOdUcCiOn De EmBrIoNeS In ViTrO

PRODUCCIÓN DE EMBRIONES IN VITRO.




Muchas de las técnicas tales como la transferencia de embriones, la fecundación in vitro, la determinación del sexo y la producción de animales transgénicos, dependen sobre todo de la capacidad de mantener la viabilidad de los embriones durante un tiempo variable que puede ser desde horas hasta años fuera del aparato genital femenino, asegurando su posterior desarrollo.



Para poder producir embriones in vitro, primero tenemos que conseguir la maduración de los oocitos, la capacitación del semen que vamos a utilizar para fecundar y después el cultivo de los embriones obtenidos.



Desde 1935 Pincus y Enzman descubrieran que oocitos de coneja inmaduros eran capaces de completar su maduración in vitro sin la inhibidora influencia de los folículos que los contenían. Numerosos han sido los estudios de investigación que se han llevado a cabo para poder descubrir cuales son las circunstancias ideales para que el oocito inmaduro complete su maduración nuclear y citoplásmica in vitro y así poder utilizar estos oocitos para fecundarlos y posteriormente cultivarlos in vitro. El conjunto de estos estudios en los últimos 20 años ha conseguido notables avances y ha explicado numerosas incógnitas que hace unos años eran imposibles de descifrar. Si bien en realidad hoy en día la técnica se basa en: que oocitos madurados, fecundados y cultivados in vitro, cuando son transferidos a hembras receptoras no se producen más de un 30-40% de gestaciones; por lo tanto, a pesar de todos los avances realizados hay que conseguir unos mejores resultados, de gestación (Hansel 2003).



Mayor número de gestaciones (60%) se obtienen cuando se recogen oocitos preovulatorios directamente del ovario por ultrasonidos (OPU), se maduran, fecundan y desarrollan in vitro (Pieterse et al 1992), (Kane, 2003).



TrAnSfErEnCiA dE eMbRiOnEs

Erickson, 1966, señaló que los ovarios de las hembras están capacitados para producir cientos de miles de oocitos durante su vida reproductiva; sin embargo, el número de crías que se obtienen de las hembras gestantes es muchísimo menor. La transferencia de embriones obtiene un mayor rendimiento, de la producción ovárica de esas hembras. En la década de los 80 y principios de los años 90 numerosos fueron los estudios que se realizaron para conseguir que hembras de alta calidad genética, ovularan oocitos después de un tratamiento hormonal (hiperestimulación ovárica o superovulación), se las inseminara con semen de un macho también de alta calidad genética. Por lo tanto a esta hembra denominada donante, tratada con hormonas conseguíamos que en un ciclo produjera 10-12 oocitos que se fecundaban in vivo con semen de un toro de alta calidad genética y así se podían obtener 10-12 embriones de calidad extraordinaria en un solo ciclo. Los embriones de la misma serian transferidos a otras hembras, denominadas receptoras o nodrizas. Aunque al principio solo se podían recoger por métodos quirúrgicos, años más tarde se empezaron a emplear métodos no quirúrgicos de recogida de embriones en grandes animales por ej. A los 4-6 días de la inseminación en la vaca, y mediante la introducción de un catéter de 2 vías se realizaba la perfusión de los cuernos uterinos con solución salina, posteriormente se recogía el líquido inyectado y se procedía a la búsqueda y selección de los embriones obtenidos para su transferencia directa a una hembra receptora. Esta tecnología permite explotar mejor el potencial genético de los animales de tal manera que en sus

inicios era una técnica experimental y desde finales de los 90 ha pasado a ser una técnica utilizada de aplicación comercial. Hoy en día, 530.000 embriones de vaca son transferidos en el mundo, 8.000 embriones de yegua, 9000 de oveja y 82.000 de cerda, (Thibier 2001). Los resultados actuales son los siguientes: en la vaca superovulada que produce 5,7 embriones transferibles después del tratamiento, se recomienda superovularla cada 2 meses; por lo tanto ese animal dará un total de 35 embriones transferibles al año. Si en este animal consideramos unos resultados de un 50% de gestaciones, se lograrán 17 terneros en un año, (Thibier, 2001).

TrAnSfErEnCiA dE eMbRiOnEs

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